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    Nature Methods:西湖大學研究團隊合作發現來自StayGold高亮且穩定的單體綠色熒光蛋白

    發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-02-29     
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    2024年2月26日,來自俄羅斯國家研究中心Fedor V. Subach和西湖大學Kiryl D. Piatkevich研究團隊合作在《自然-方法學》發表了標題為“Bright and stable monomeric green fluorescent protein derived from StayGold.”的新突破研究成果,發現了一種來自StayGold高亮且穩定的單體綠色熒光蛋白。

     

    熒光蛋白(FPs)是活細胞成像和超分辨率顯微鏡中有價值的分子探針,可以對靶蛋白、細胞結構和細胞器進行特異性標記。熒光亮度和光穩定性是確定FP用于熒光顯微鏡的總體效用的兩個主要特性。因此,自1992年克隆出首個綠色熒光蛋白(GFP)以來,蛋白質工程師們一直致力于提高其亮度和光穩定性,這是擴大熒光成像時空尺度的關鍵因素。偶然的是,最近發現的一種綠色熒光蛋白StayGold(來自角鼻藻的野生型綠色熒光蛋白的點突變體)表現出比任何現有的FP高一個數量級的特殊光穩定性,同時具有較高的分子亮度。然而,StayGold形成專性二聚體,限制了其作為蛋白質和膜標記的熒光標簽的適用性,這是由于融合物的潛在錯誤定位和生物傳感器開發的限制。

     StayGold高亮且穩定的單體綠色熒光蛋白


    研究人員發現了一種名為mBaoJin的StayGold單體變體并解析了其晶體結構,這種變體既保留了其前體的有益特性,又可用作結構蛋白和膜蛋白標簽。研究人員將mBaoJin與通用的綠色熒光蛋白,以及其他新近推出的StayGold單體和假單體衍生物進行了系統比對,結果表明mBaoJin是一種高亮、光穩定的熒光蛋白,具有快速成熟和高pH值/化學穩定的特點。研究進一步展示了mBaoJin在模式生物(包括秀麗隱桿線蟲和小鼠)神經元標記中的適用性。

     

    研究人員表示,綠色熒光蛋白StayGold的高亮度和光穩定性使其成為一種具有潛力的探針,可用于長期活細胞成像。然而,它二聚體的性質使其無法用作某些蛋白質的熒光標簽。

     

    文章來源:

    Zhang, Hanbin, Lesnov, Gleb D., Subach et al, Bright and stable monomeric green fluorescent protein derived from StayGold.DOI: 10.1038/s41592-024-02203-y ,Nature Methods:最新IF:47.99


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